厭氧培養(yǎng)袋培養(yǎng)的實驗步驟
更新時間:2022-10-14 點擊次數(shù):1475
厭氧培養(yǎng)袋可在小或中空間制作厭氧環(huán)境,操作方便,無需任何復(fù)雜的專用設(shè)備,可在所有實驗室使用,非常適合實驗室中小型試驗操作。
厭氧培養(yǎng)袋可用于培養(yǎng)厭氧菌,專用厭氧菌需要在嚴(yán)格的無氧氣體環(huán)境中生長,氧氣會對細菌產(chǎn)生毒性作用。一些厭氧菌在含有5%-10%二氧化碳的氣體環(huán)境中可以耐受低濃度氧氣。
常見的專用厭氧菌有梭菌,如產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、破傷風(fēng)梭菌、困難梭菌等,雙歧桿菌,如嬰兒雙歧桿菌、動物雙歧桿菌等,擬桿菌、梭菌、厭氧消化鏈球菌等。
培養(yǎng)基要與厭氧環(huán)境氣體循環(huán),如試管、錐形瓶等容器,以確保塞的透氣性;培養(yǎng)平板容器時,要確保平板容器具有良好的透氣性,不能用密封膜密封纏繞。
實驗步驟:
1、將已接種細菌的血平板以及產(chǎn)氣管,指示劑,催化劑放入塑料袋內(nèi),排出袋中氣體,卷疊好袋口,并用大鐵夾將塑料袋夾緊密,以防漏氣。
2、折斷產(chǎn)氣管,管內(nèi)發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生CO2和H2.CO2供細菌生長需要,能促使許多厭氧菌生長,鈀催化劑可催化H2和袋內(nèi)的O2生成H2O,從而耗盡袋內(nèi)的O2,待其化學(xué)作用完成后,袋內(nèi)即處于無氧狀態(tài)。(由此造成厭氧環(huán)境約需半小時)
3、于產(chǎn)氣管弄破半小時后,將裝有已還原成無色的美藍指示劑安瓿弄破,若溶液變藍色,表示美藍被氧化,袋內(nèi)仍有氧氣存在,如指示劑不變藍色,即表示袋內(nèi)已處于無氧狀態(tài)。
4、將厭氧袋置37℃溫箱孵育,48小時后觀察結(jié)果。